Клонирующий вектор (cloning vector) — это вектор, представляющий собой плазмиду или вирусную ДНК, который используется для клонирования тестируемых фрагментов ДНК. Клонирующий вектор служит инструментом для введения и амплификации (копирования) специфических последовательностей ДНК в клетках-хозяевах. Он содержит необходимые элементы для репликации и экспрессии вставленных фрагментов, такие как промоторы, сайты связывания рибосом, а также участки для селективного отбора трансформированных клеток.
Процесс клонирования с использованием клонирующего вектора включает несколько этапов. Сначала тестируемый фрагмент ДНК встраивают в вектор с помощью рестрикционных эндонуклеаз, которые разрезают ДНК в определённых последовательностях. Затем полученную рекомбинантную ДНК вводят в клетки-хозяева, например, бактерии или дрожжи. В клетках-хозяевах вектор реплицируется автономно, а вставленный фрагмент ДНК копируется вместе с ним.
Клонирующие векторы могут быть сконструированы таким образом, чтобы обеспечивать различные уровни экспрессии вставленных генов, а также включать дополнительные элементы, такие как маркёры устойчивости к антибиотикам или флуоресцентные белки для облегчения отбора и визуализации трансформированных клеток. Это делает клонирующие векторы мощным инструментом в молекулярной биологии и генной инженерии.
Список использованной научной литературы: