Секвенирование (sequencing)

Секвенирование (от англ. sequencing — установление последовательности) — это метод, позволяющий определить порядок расположения мономерных звеньев в полимере. В биохимии этот термин используется для обозначения процесса расшифровки нуклеотидных последовательностей дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) или рибонуклеиновой кислоты (РНК) и аминокислот в белке.

Современные методы секвенирования геномов включают:

  1. Метод химической деградации (Максама-Гилберта). Этот метод основан на использовании химических реагентов, которые специфически разрушают определённые участки ДНК или РНК, в зависимости от их нуклеотидного состава. После обработки образца реагентами проводится электрофорез, который позволяет разделить фрагменты ДНК или РНК по их размеру. Затем полученные фрагменты анализируются для определения последовательности нуклеотидов.

  2. Метод синтеза ДНК на матрице в присутствии терминаторов синтеза (по Сенджеру). Этот метод заключается в синтезе новой цепи ДНК на основе исходной матрицы с использованием терминаторов, которые останавливают синтез при достижении определённых нуклеотидов. После завершения синтеза проводится анализ полученных фрагментов для определения последовательности нуклеотидов в исходной ДНК.

Эти методы позволяют точно определить последовательность мономерных звеньев в полимерах, что имеет важное значение для понимания структуры и функции генетического материала, а также для разработки новых методов диагностики и лечения заболеваний.

Список использованной научной литературы:

  1. Sanger F., Nicklen S., Coulson A.R. DNA sequencing with chain-terminating inhibitors // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. — 1977. — Vol. 74, no. 12. — P. 5463–5467.
  2. Maxam A.M., Gilbert W. Sequencing end-labeled DNA with base-specific chemical cleavages // Methods in Enzymology. — 1980. — Vol. 65. — P. 499–560.