Лигирование (ligation)

Лигирование (ligation) - Процесс соединения двух линейных молекул нуклеиновых кислот посредством фосфодиэфирных связей, осуществляется с участием фермента ДНК-лигазы. В генной инженерии лигирование – прием, с помощью которого чужеродная ДНК встраивается в плазмиду.

Комментарии*

Дополнения к описанию лигирования:

  • Ключевые свойства механизма:

    • Требует наличия 5'-фосфатной и 3'-гидроксильной групп на соседних нуклеотидах
    • Протекает с потреблением ATP или NAD⁺ (в зависимости от типа лигазы)
    • Обеспечивает ковалентное сшивание разрывов в сахаро-фосфатном острове
  • Практическое применение:

    • Создание рекомбинантных ДНК для клонирования
    • Сборка генетических конструкций в синтетической биологии
    • Репарация одноцепочечных разрывов (ников) в клетке
  • Важные примеры:

    • T4 ДНК-лигаза (из бактериофага T4) - наиболее часто используемая в лабораторной практике
    • Термостабильные лигазы для ПЦР-методов
    • Лигазы E. coli участвуют в репликации и репарации ДНК
*Подобраны с помощью LLM, верифицированы, но возможны неточности.