Направленный мутагенез (site-directed (directed) mutagenesis)

Направленный мутагенез (site-directed (directed) mutagenesis) — это метод, который позволяет индуцировать мутации в определённом участке (сайте) клонированной последовательности ДНК in vitro. Этот метод широко используется в биохимических и молекулярно-биологических исследованиях для изучения функций белков и нуклеиновых кислот.

С помощью направленного мутагенеза можно идентифицировать функционально значимые участки в молекулах белков и нуклеиновых кислот. Например, можно определить, какие аминокислоты в белке отвечают за его ферментативную активность или за взаимодействие с другими молекулами. Также можно получать белки и ферменты с изменёнными свойствами, что может быть полезно для разработки новых лекарственных препаратов или биотехнологических продуктов.

Одним из примеров применения направленного мутагенеза является анализ закономерностей третичной структуры гормона роста млекопитающих. Например, замена лизина на лейцин в положении 112 позволяет исследовать, как эта замена влияет на пространственную структуру гормона и его биологическую активность.

Для проведения направленного мутагенеза используются различные подходы, включая олигонуклеотид-направленный мутагенез, ПЦР-мутагенез и другие методы. Эти методы позволяют точно вводить желаемые мутации в определённые сайты ДНК.

Список использованной научной литературы:

  1. Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. Molecular Cloning: A Laboratory Manual. — Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989.
  2. Kunkel T.A. Rapid and efficient site-directed mutagenesis without phenotypic selection // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. — 1985. — Vol. 82, no. 24. — P. 8838–8842.
  3. Liu D.R., Schuler G.D., Kunkel T.A., Elledge S.J. Site-specific mutagenesis by overlap extension using the polymerase chain reaction // Gene. — 1992. — Vol. 114, no. 1. — P. 211–215.