Нозерн-блоттинг (Northern blotting)

Нозерн-блоттинг (Northern blotting) — это метод, аналогичный методу Саузерн-блоттинга, который применяется для анализа и визуализации фрагментов и молекул РНК. В отличие от Саузерн-блоттинга, где используются нитроцеллюлозные фильтры, в Нозерн-блоттинге применяется фильтр из диазобензилоксиметил-целлюлозы. Этот метод позволяет идентифицировать и количественно определить определённые последовательности РНК в образце.

Принцип метода заключается в следующем:

1. Образец РНК подвергается электрофорезу в агарозном геле для разделения по размеру.
2. После электрофореза гель переносят (блоттируют) на фильтр из диазобензилоксиметил-целлюлозы.
3. На фильтр наносится комплементарная ДНК-зонд, которая специфически связывается с целевой РНК.
4. Связанную РНК обнаруживают с помощью радиоактивно или химически меченых зондов, которые могут быть визуализированы с помощью рентгеновской плёнки или других методов детекции.

Метод Нозерн-блоттинга был предложен Дж. Олвайном и его коллегами в 1977 году и с тех пор широко используется в молекулярной биологии и генетике для изучения экспрессии генов, анализа альтернативных сплайсингов и диагностики генетических заболеваний.

Список использованной научной литературы:

1. Alwine, J. C., et al. (1977). «Detection of specific sequences among DNA fragments separated by gel electrophoresis». Biochimica et Biophysica Acta (BBA) — General Subjects.