ЦИТОХИМИЯ, изучает распределение
и содержание внутри клетки хим. соед., динамику их превращений в процессах
жизнедеятельности (в т. ч. при патологии). Цитохимия возникла в 1-й пол. 19 в.;
значительно усовершенствована и широко используется с сер. 20 в. для диагностич.
целей, в медицине, биохимии и др.
Осн. методы цитохимии: 1) микрохимия - выделение
определенных клеточных структур (напр., митохондрий или рибосом) путем
дифференциального центрифугирования и осуществление хим. анализа их состава.
2) Микроспектрофотометрия - определение в-в с помощью микроскопа-спектрофотометра
непосредственно в клетке по характерному спектру поглощения (напр., нуклеиновых
к-т по поглощению пуринами и пирими-динами УФ излучения). 3) Микроинтерферометрия
- оценка массы клетки по сдвигу фазы поляризованного света. После экстракции
определенного в-ва можно измерить его содержание в клетке. Микроспектральные
и интерферометрич. методы позволяют проводить хим. анализ живых клеток.
4) Цитофотометрия окрашенных клеток - качеств. и(или) количеств. определение
в-ва в клетке путем фотометрии окрашенного продукта, к-рый образуется при
взаимод. анализируемого в-ва с красителем или др. в-вом. Измерения осуществляют,
используя микроскоп, монохроматор, фотоумножитель и регистрирующее устройство.
Для количеств. исследований применяют также анализаторы изображений. Один
из точных методов цитофотометрии - р-ция Фельгена [взаимод. альдегидных
групп, возникших в результате кислотного гидролиза ДНК, с фуксинсернистой
к-той (реактив Шиффа) с образованием красно-малинового комплекса, к-рый
специфически характеризует распределение ДНК и ее кол-во в ядре]. Активные
красители (проционы) образуют ковалентные связи с разными реакционноспособными
группами белков или углеводов, окрашивая клеточные структуры. В результате
разл. р-ций выявляются ферменты, определяется их локализация и активность.
5) Флуоресцентная микроскопия и цитофлуорометрия. Осуществляют р-цию в-ва
с флуоресцирующим маркером (см., напр., Липидные зонды)и затем
по интенсивности флуоресценции определяют кол-во этого в-ва. 6) Авторадиография
- определение локализации определенного метаболич. процесса и его интенсивности
в клеточных структурах благодаря введению в организм или в среду клеточной
культуры метаболитов, меченных радионуклидами, и приготовления цитоавтографа
(препарата из клеток и фотоэмульсии, к-рую проявляют после экспозиции).
7) Иммуноцитохимия -выявление расположения определенного антигена внутри
клетки путем получения комплексов между антителами, конъюгированными с
красителями, и анализируемыми антигенами.
В большинстве методов цитохимии может использоваться
также электронный микроскоп.
Лит.: Пирс Э., Гистохимия, пер. с англ., М., 1962; Бродский В. Я., Трофика клетки, М., 1966; Введение в количественную цитохимию, пер. с англ., М., 1969; Зеленин А.В., Взаимодействие аминопроизводных акридина с клеткой, М., 1971; Роджерс Э., Авторадиография, пер. с англ., М., 1972; Агроскин Л.С., Папаян Г. В., Цитофотомстрн", Л., 1977; Иванов В.Б., Активные красители в биологии, М., 1982; Бродский В.Я.,Нечаева Н.В., Ритм синтеза белка, М., 1988.
В. Я. Бродский.